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植物活性蛋白分离纯化的系统和技术

蛋白质是人的生命基础,于是,人们研究讨论如何从动植物体内提取分离蛋白质,然后加以利用,植物蛋白的分离与纯化技术,就是在这一环境下被发现并研究的。植物活性蛋白分离纯化不仅被应用在保健食品上,还被运用在医疗以及科学研究上。但是,植物的提取物比较复杂,不仅含有植物纤维、鞣质、胶体、淀粉等大分子杂质同时还含有许多小分子有效成分。所以我们需要采用先进的膜分离技术替代传统化学方法,快速高效的分离出目标产物,进行提纯。高植物活性蛋白的分离与纯化涉及物理、化学和生物等各方面知识。首先我们得考虑要分离的物质里面组成的化学分子的种类数量及其比例,然后我们需要将混合物通过物理力场的作用使它所包含的物质进行分离。这些技术包括:电泳,超速离心,超滤等。而在分离的过程中,我们必须保证分离出来的每个物质都完整独立且具有活性。


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蛋白质(包括酶)的提取方法主要有以下几个:

水溶液提取法需要注意PH值和盐浓度

我们常用稀盐和缓冲系统的水溶液来对蛋白质进行提取。因为这两种药剂对蛋白质稳定性好、溶解度大。在提取的时候需要注意温度的高低,因为大多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,温度高利于溶解,可以缩短提取时间。但是过高的温度容易使蛋白质失去活性,所以我们应选择适宜的温度,而蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点。


有机溶剂提取法适用范围较广

一些不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中的特别蛋白质或酶——和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多,可用具有的一定亲水性,较强亲脂性的乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂,它们是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇亲脂性强,特别是溶解磷脂的能力强;且丁醇兼具亲水性,在溶解度范围内不会引起酶的变性失活。所以丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越。另外,丁醇提取法的pH及温度选择范围较广,也适用于动植物及微生物材料。


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